产品简介:基因随机突变试剂盒( Random Mutagenesis Kit)是一种基于易错PCR(Error Prone PCR)的方法使目的基因片段通过PCR扩增后发生一定几率的随机突变的试剂盒。
基因的随机突变是研究蛋白结构与功能的关系、以及抑制或者改良甚至创造蛋白或酶活性的重要方法。
易错PCR方法通常是指通过易错耐热DNA聚合酶进行PCR扩增,从而在目的基因序列中引入随机突变的方法。易错PCR方法在目的基因序列中引入随机突变后,最终很可能在蛋白水平上产生氨基酸序列的突变,从而可以随机产生活性更强、更弱甚至失去活性的蛋白或酶,也有可能使蛋白或酶产生新的活性。
为了分析蛋白结构和功能的关系,理想的突变应该是每个蛋白发生1个氨基酸改变(1-2核苷酸突变);在蛋白进化研究方面,理想的突变是每个蛋白发生1-4个氨基酸改变(约2-7核苷酸突变);从突变文库中筛选高活性的蛋白或者酶则通常希望每个基因产生20个左右的核苷酸突变。
本试剂盒提供的RandomMut DNA polymerase,是一种全新的专门用于易错PCR的DNA聚合酶,在配套的反应缓冲液中加入推荐量的Mutation enhancer情况下,可以在每kb的基因中引入约7.8个随机突变,而且这些突变是AT→GC和GC→AT两个方向的突变基本均衡的,(AT→GC mutations) / (GC→AT mutations) = 1.06,同时还会引入适量的插入(insertion)和缺失(deletion)突变。
本试剂盒扩增出来的DNA片段为黏性末端,可以直接用于常规的T载体克隆。
本试剂盒可扩增长达6kb的目的片段。
本试剂盒如果用于20µl的PCR突变体系,两种包装的本试剂盒分别可以进行50次和200次基因随机突变,如果用于50µl的PCR突变体系,两种包装的本试剂盒分别可以进行20次和80次基因随机突变。
保存条件:
-20℃保存,一年有效。
注意事项:
PCR反应非常灵敏,在使用RandomMut DNA polymerase进行PCR扩增反应时请注意避免微量待扩增DNA的污染,并尽量设置不加模板的空白对照。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
上海化科实验器材有限公司主要生产经营:实验室器材,玻璃仪器,实验室耗材,生物耗材,化学试剂,微生物试剂,样品瓶,包装瓶,实验室设备,仪器仪表等。
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